《表2 引物序列：棉花GbCML24基因的克隆及其功能分析》

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《棉花GbCML24基因的克隆及其功能分析》

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将上述合格的RNA使用PrimeScript First-Strand cDNA Synthesis Super Mix（TaKaRa，Japan）试剂盒合成cDNA第一链。以海岛棉71 240 DPA胚珠的cDNA为模板，使用引物5'-GbCML24和3'-GbCML24（表2），用高保真KOD-Plus DNA聚合酶扩增目标基因的CDS区段。PCR反应程序为：95℃5 min；94℃30 s，58℃30 s，68℃40 s，32个循环；68℃10 min。将目的片段加A尾后连接到pGEM-T上，挑取阳性克隆送测序公司进行测序。测序后的片段与转录组中获得的片段进行序列比对，序列一致为同一基因。