《表1 本研究所用引物:棉花E3泛素连接酶基因GhRING1-like的克隆及功能分析》

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《棉花E3泛素连接酶基因GhRING1-like的克隆及功能分析》


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利用Primer Premier 5.0设计PCR扩增引物(表1),以陆地棉TM-1的cDNA为模板扩增GhRING1-like全长ORF序列。利用Compute pI/Mw(http://web.expasy.org/compute_pi/)预测蛋白质的相对分子质量和等电点。PlantCARE(http://bioinformatics.psb.ugent.be/webtools/plantcare/html/)预测顺式作用元件。SMART(http://smart.embl-heidelberg.de/)分析蛋白质功能结构域。BLAST(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)搜索GhRING1-like同源蛋白并下载序列,用DNAMAN v6.0进行蛋白序列的多重序列比对,在MEGA 5.0软件中采用最大似然法构建系统进化树。