《附表1 本研究所用引物:十倍体长穗偃麦草雄性育性基因ThMs1的克隆、表达及功能分析》

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《十倍体长穗偃麦草雄性育性基因ThMs1的克隆、表达及功能分析》


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使用TRI试剂(Ta Ka Ra Bio Inc.)提取材料减数分裂期花药的RNA,并用DNaseⅠ(Promega)去除基因组DNA污染。通过First-Strand c DNA Synthesis Kit(Thermo Fisher)合成c DNA。以c DNA为模板,基于小麦及其他物种已知MS1序列设计引物(电子附表1)从小麦-十倍体长穗偃麦草中扩增ThMs1。利用LA Taq(Ta Ka Ra Bio Inc.)进行RT-PCR,并通过2%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。Primer 5.0软件设计靶向基因的特异性引物,利用SYBR Premix Ex(Ta Ka Ra Bio Inc.),经实时荧光定量PCR检测ThMs1表达特征。用于表达分析的引物见电子附表1。