《表1 本研究所用引物：水稻OsABCC10基因的克隆及其功能分析》

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《水稻OsABCC10基因的克隆及其功能分析》

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按照Life technologies公司TRIzol Reagent试剂盒的产品使用说明书提取野生型日本晴根部总RNA，使用TaKaRa公司PrimeScriptTMⅡ1stStrand cD-NA合成试剂盒逆转录成cDNA。根据OsABCC10的CDS序列及pYL322-P35s-GFP和pYES2载体序列设计携带有SalⅠ和HindⅢ酶切位点序列的扩增引物（表1），以cDNA为模板，通过PCR的方法分别进行扩增，所得产物切胶回收后分别连接到pYL322-P35s-GFP和pYES2载体上，转入处于感受态状态的大肠杆菌，挑取单克隆，分别用pYL322-P35s-GFP和pYES2载体上序列引物GFP-F和T7F及OsABCC10序列上的引物OsABCC10-1 300R进行菌落PCR验证，所得阳性克隆菌液用50%的甘油按等量的比例将其保存于-80℃冰箱以备用，并送质粒到公司测序，测序正确，即获得正确的pYL322-P35s-OsABCC10-GFP和pYES2-OsABCC10克隆载体。