《表1 本研究中所用引物:番茄转录因子基因SlWRKY16的克隆及原核表达分析》

《表1 本研究中所用引物:番茄转录因子基因SlWRKY16的克隆及原核表达分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《番茄转录因子基因SlWRKY16的克隆及原核表达分析》


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注:括号内为保护碱基,下划线表示内切酶位点。

利用RNAprep Pure Plant Kit(DP441,天根,北京)提取番茄幼苗叶片总RNA,用All-In-One Master Mix(Cat#G492,Abm,加拿大)将其反转录为c DNA。根据Sl WRKY16的开放读码框(Open Reading Frame,ORF)设计引物(表1),利用高保真酶Easy Pfu DNA Polymerase(全式金,北京)进行PCR扩增。将扩增产物连接到p MD19-T克隆载体上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞(博迈德,北京)。随机挑取单菌落进行PCR及质粒双酶切鉴定,并将阳性质粒送至新疆昆泰锐公司进行测序分析。