《表1 引物序列:长穗偃麦草EeSKOR基因片段的克隆、表达及其生物信息学分析》

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《长穗偃麦草EeSKOR基因片段的克隆、表达及其生物信息学分析》


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盐处理下长穗偃麦草幼苗总RNA提取、c DNA第一链的合成、Ee SKOR基因实时荧光定量参照张琳等(2017)描述的方法进行,长穗偃麦草Ee SKOR实时荧光定量RT-PCR引物Ee SKOR F/Ee SKOR R,其内参基因Actin实时荧光定量PCR引物Ee Actin F/Ee Actin R (表1)。在Bio-Rad CFX96 Touch仪器上进行实时荧光定量PCR实验。RT-PCR反应条件为95℃30 s,95℃5 s,56℃30 s,72℃30 s,39个循环,95℃15 s,55℃30 s,95℃5 s。采用2-ΔΔCT方法计算长穗偃麦草Ee SKOR在不同盐浓度胁迫下及高盐和低盐不同时间处理下的相对表达量,3次重复。