《表1 引物序列：薏苡油脂合成关键基因克隆及其生物信息学分析》

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《薏苡油脂合成关键基因克隆及其生物信息学分析》

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根据NCBI上已公布的拟南芥、水稻、高粱、玉米、二穗短柄草和大豆等的SAD、FAD2和DGAT基因序列，采用ClustalX分别对3个基因的中间片段进行简并引物设计（表1），引物委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成。以cDNA为模板，中间片段的PCR反应体系50.0μL:2×Ex Taq Buffer 25.0μL，dNTP Mix（10 mmol/L）1.0μL，Ex Taq DNA聚合酶1.0μL，cDNA模板5.0μL，上、下游引物（10×）各1.5μL，ddH2O 15.0μL。扩增程序：94℃预变性2 min；94℃30 s，55℃30 s，72℃1 min，进行35个循环；72℃延伸10 min。PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳检测后，用胶回收试剂盒回收目的片段并送至生工生物工程（上海）股份有限公司进行测序鉴定。