《表1 引物序列信息:兰坪乌骨绵羊PDGFRL基因编码区序列扩增及其生物信息学分析》

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《兰坪乌骨绵羊PDGFRL基因编码区序列扩增及其生物信息学分析》


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PCR反应为25.0μL的反应体系,其中含DNA模板(20 ng/μL) 1μL、金牌MIX(green)22μL、上下引物(10μmol/L)各1μL。多次探究后设定不同引物PCR反应条件,Exon1-Exon3、Exon5反应条件:98℃预变性2 min,98℃变性10 s,退火温度见表1,退火10 s,72℃延伸10 s,30个循环,72℃后延伸1 min;Exon4、Exon6反应条件:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,退火温度见表1,退火10 s,72℃延伸10 s,30个循环,72℃后延伸1 min。PCR产物经电泳检测后送至昆明硕擎生物技术有限公司进行测序。