《表1 实验所用引物:马铃薯泛素结合酶基因StUBC17的克隆与功能分析》

《表1 实验所用引物:马铃薯泛素结合酶基因StUBC17的克隆与功能分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《马铃薯泛素结合酶基因StUBC17的克隆与功能分析》


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注:下划线处是酶切位点

将前人公布的差异表达片段TDF8-11-2(GenBank:EL732271)序列在NCBI网站和茄科基因组数据库(http://solanaceae.plantbiology.msu.edu/index.shtml)上进行BlAST比对,发现TDF8-11-2与马铃薯泛素结合酶E2-17基因(StUBC17)序列相似率高达87%。初步判断该序列表达标签对应基因为StUBC17。根据StUBC17全长序列设计引物(表1),以“C88”的cDNA为模板,采用Pfu高保真PCR聚合酶(货号:P501,南京诺唯赞生物科技有限公司)进行PCR扩增。扩增产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳检测,回收,并与pEASY-T1克隆载体(货号:CT101,北京全式金生物技术有限公司)连接,测序。