《表1 本实验所用引物:洋葱AcLOX2基因的克隆与表达分析》
以合成的c DNA为模板,依据转录组测序结果设计基因特异性引物进行PCR扩增(表1)。反应体系(20μL):c DNA 1μL,LOX2-M-F 1μL,LOX2-M-R 1μL,预混液10μL,dd H2O 7μL;基因克隆反应条件:94℃5 min;94℃30 s,52℃30 s,72℃90 s,30个循环;72℃5 min;4℃保存。通过c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of c DNA ends,RACE),扩增3'和5'末端序列(李倩,2016)。1%琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物并回收目的条带,回收产物连接载体,转化大肠杆菌(Escherichia coli),选取阳性克隆送测序。
图表编号 | XD00224408800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.25 |
作者 | 高璐瑶、李倩、周雪梅、王勇、黄科、王永勤 |
绘制单位 | 北京市农林科学院蔬菜研究中心、农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室、东北农业大学园艺园林学院、北京市农林科学院蔬菜研究中心、农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室、湖南农业大学园艺学院、北京市农林科学院蔬菜研究中心、农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室、东北农业大学园艺园林学院、东北农业大学园艺园林学院、湖南农业大学园艺学院、北京市农林科学院蔬菜研究中心、农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室 |
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