《表1 实验中所用引物：小粒野生稻OmSKP1基因的克隆与功能初探》

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《小粒野生稻OmSKP1基因的克隆与功能初探》

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根据RNA提取试剂盒的说明书，以小粒野生稻叶片为材料提取总RNA，根据c DNA反转录试剂盒的说明书，将总RNA反转录成cDNA。以F1和R1（表1）为引物，以NPB的cDNA为模板进行PCR扩增，获得OmSKP1基因片段。PCR扩增程序：95℃，5 min；95℃，30 s；60℃，30 s；72℃，30 s（30个循环）；72℃，10 min；16℃，保存。将PCR产物进行凝胶电泳，并切胶回收目的条带，将目的条带与pEASY-Blunt Zero Clong载体进行同源重组反应，并转化大肠杆菌感受态细胞，根据同源重组克隆试剂盒的步骤进行，将涂好的LB培养基37℃培养12h，随机挑取5～10个较大的单克隆进行菌落PCR阳性检测，之后抽提阳性克隆质粒，并进行酶切，进一步验证阳性克隆，之后进行测序，得到Om SKP1基因全长CDS。