《表1 引物序列:西番莲PeERG基因克隆及其表达模式分析》

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《西番莲PeERG基因克隆及其表达模式分析》


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根据实验室前期研究获得的候选基因unigene序列(Liu et al.,2017),设计PCR引物(表1),以‘平塘1号’叶片cDNA为模板,开展候选基因片段的PCR扩增和测序验证。基于测序验证获得的基因片段序列设计RACE特异引物(表1),按照SMARTerTMRACE cDNA Amplification Kit操作指南进行3'-RACE和5'-RACE巢式PCR扩增,并经PCR产物回收、连接、转化、测序和拼接,预测其开放阅读框(open reading frame,ORF)。最后设计ORF扩增引物(表1),完成ORF的PCR扩增和测序验证。