《表1 扩增引物及其序列：黄沙鳖抗菌肽cathelicidin基因克隆及表达特征分析》

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《黄沙鳖抗菌肽cathelicidin基因克隆及表达特征分析》

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以RT-PCR克隆黄沙鳖cathelicidin基因的中间片段。参考NCBI上已公布中华鳖等相近物种的cathelicidin基因序列，设计其中间片段的扩增引物cathp-F和cath-p-R（表1），反应体系和扩增程序参照Taq DNA聚合酶说明书。同时采用RACE对黄沙鳖cathelicidin基因的5'端和3'端序列进行克隆。以已获得的黄沙鳖cathelicidin基因中间序列为基础，分别设计5'-RACE和3'-RACE特异性引物（表1），按SMARTer RACE 5'/3'Kit试剂盒说明克隆黄沙鳖cathelicidin基因的5'端和3'端序列。所有PCR产物经切胶回收纯化后，分别连接至pMD18-T载体上，再转化DH5α感受态细胞，经菌液PCR验证呈阳性的克隆送至广州华大生物科技有限公司测序。