《表2 PCR扩增体系：重组牛LAP-CATHL2融合抗菌肽的克隆及原核表达》

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《重组牛LAP-CATHL2融合抗菌肽的克隆及原核表达》

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42℃水浴60 min，然后70℃水浴15 min，然后冰上冷却，所获得的产物即为cDNA，可直接用作一下步PCR反应的模板。从NCBI上查找牛（bos）的β-防御素LAP基因（NM＿203435.4）序列，用Primer5.0软件设计引物，上游：CGGAATTCATGAGGCTCCAT-CACCTGCTC（下划线为EcoR I的酶切位点）下游：GCGTCGACTTACTTCCTCCTGCAGCATTT（下划线为Sal I的酶切位点）。以前面合成的c DNA为模板，以LAP的原核表达载体的上、下游引物为引物，进行PCR扩增。扩增体系与条件如表2、表3。