《表1 引物序列：肝靶向肽-人肿瘤坏死因子融合基因的克隆、可溶性表达及鉴定》

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《肝靶向肽-人肿瘤坏死因子融合基因的克隆、可溶性表达及鉴定》

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注:划线部分为酶切位点，黑体部分为TNFαN端引入的CSP I-plus 19个氨基酸基因序列。

根据NCBI Genbank公布的TNFα和CSP I-plus基因序列，用Primer Premier 5.0生物软件设计特异性引物P1～P4，如表1所示。P1、P2引物扩增TNFα基因，约702 bp，引物P3、P4、P2扩增CSP-TNFα融合基因，不含编码TNFα信号肽基因序列，约543 bp。引物P2含有无终止子TNFαC端互补序列和XhoⅠ限制性内切酶位点引物，P3含有NdeⅠ限制性内切酶位点和编码CSP I-plus 19个氨基酸的部分序列，引物P4含有与P3相同序列、编码CSP I-plus 19个氨基酸的其余部分序列和编码无信号肽TNFαN端序列。引物由Invintrogen公司合成。