《表1 引物序列:let-7b及肿瘤坏死因子α在重度子痫前期胎盘组织中的表达及意义》

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《let-7b及肿瘤坏死因子α在重度子痫前期胎盘组织中的表达及意义》


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常规使用TRIzol法(美国Invitrogen公司)于胎盘组织中提取总RNA,后采用紫外分光光度计对RNA纯度以及浓度进行检测,逆转录试剂盒PrimeScriptTMRT reagent Kit(TakaRa,大连宝生物公司)、miRNA First-Stand Synthesis Kit(miRNA,TakaRa)分别合成cDNA,用Thermal Cycle Dice荧光定量PCR仪分别对其进行定量检测,根据Takara公司的SYBR Premix Ex Taq TMIⅡ说明书配置反应溶液,let-7b扩展条件95℃5min;95℃10s,60℃50s,35个循环;TNF-α为95℃30s,95℃5s,55℃30s,72℃30s,45个循环,分析其溶解曲线及循环阈值(CT值),采用2-ΔΔCt方法计算其相对表达量,并进行统计分析。引物序列见表1。