《表1 引物序列表:子痫前期患者胎盘中微小RNA-34a的表达及相关机制》

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《子痫前期患者胎盘中微小RNA-34a的表达及相关机制》


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注:MCL-1:髓细胞白血病因子-1(myeloid celll eukemia-1)。

mi R-34a、MCL-1和内参β-actin由上海生工生物科技公司设计与合成,序列见表1。每例产妇胎盘娩出后以脐带为中心剪取1 cm×1 cm×1 cm胎盘组织,-80℃保存备用,取50 mg胎盘组织于液氮中研磨后加入1 ml Trizol(日本Ta Ka Ra公司),提取组织总RNA,使用逆转录试剂盒(日本Ta Ka Ra公司)反转录出c DNA。每例样品取10μg c DNA使用SYBR Green荧光染料试剂盒(日本Ta Ka Ra公司)和美国ABI-Vii A 7 Detection System实时荧光定量PCR仪进行扩增,检测目的基因的表达水平,扩增条件:94℃预变性2 min;94℃变性20 s,60℃退火延伸30 s,扩增40个循环。7500 Software 2.0.6软件以内参为基础,进行熔解曲线分析,△CT=每个标本所测基因(mi R-34a、MCL-1或β-actin)的CT值-基线内对照CT值,△△CT=目的基因的△CT值-内参的△CT值,2-△△Ct表示目的基因的表达水平。