《表1 靶向meq基因的gRNA及用于马立克病病毒（MDV）突变体鉴定的引物序列表》

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《利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建马立克病病毒超强毒株原癌基因meq缺失株及其鉴定》

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注：括号中粗体碱基为PAM序列。

根据vvMDV毒株Md5（GenBank登录号：AF243438.1）和GX0101(GenBank登录号：JX844666.1）的meq基因及其邻近序列，使用GenScript’s gRNA在线设计软件（https：//www.genscript.com）进行gRNA设计，然后分别合成靶向meq基因5'端和3'端的gRNA各3个meq-gR-F/meq-gR-R（表1），5'端分别加上BbsⅠ酶切位点CACC和AAAC，合成gRNA互补双链。利用Premier Primer 5.0软件设计PCR扩增引物，其中引物对Step2-F/Step2-R用于鉴定构建的pX459-gRNA质粒；meq-F/meq-R用于PCR扩增meq基因；yg-gB-F/yg-gB-R和yg-OVO-F/yg-OVO-R用于qPCR测定病毒基因拷贝数。上述引物均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。