《表1 本研究所用的引物：玉米穗发芽突变体vp-like8的遗传分析及突变基因鉴定》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《玉米穗发芽突变体vp-like8的遗传分析及突变基因鉴定》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

用CTAB方法分别提取突变体vp-like8和vp1授粉后30 d分离果穗上正常与穗发芽籽粒的基因组DNA[24]。依据Vp1基因组序列，利用Primer3引物设计软件（http://primer3.ut.ee/），设计8对引物（VP1-G-F1/R1～VP1-G-F8/R8）（表1） ，扩增产物瓦片式覆盖了Vp1基因组序列。分别以突变体vp-like8与vp1基因组DNA为模板，扩增Vp1基因片段，将PCR产物进行测序（北京六合华大基因科技有限公司），分析测序结果，分别判断Vp1基因的突变情况。PCR扩增体系为2×KOD buffer 25μL，引物（10μmol L–1）0.75μL，模板DNA 2μL，dNTPs（2.5μmol L–1）5μL，KOD FX酶（1.0 UμL–1）1μL，用超纯水补至50μL。PCR扩增条件为94℃预变性5 min；94℃变性10 s，59℃退火30s，68℃延伸1 min，循环数为35；68℃延伸7 min。用1%琼脂糖凝胶电泳检测目的条带[23]。