《表1 本研究所用引物：陆地棉蔗糖磷酸合成酶基因家族的鉴定及表达分析》

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《陆地棉蔗糖磷酸合成酶基因家族的鉴定及表达分析》

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使用Premier 5.0软件，根据基因的CDS序列设计特异性引物，内参基因Actin（GenBank登录号为AY907703.1）和GhSPS基因的引物序列见表1。以反转录得到的cDNA为模板，于BIOER荧光定量PCR仪上进行荧光定量聚合酶链式反应（Quantitative real-time polymerase chain reac tion，qRT-PCR）分析。反应总体系为20μL，包括2×SYBR Premix Ex Taq(TaKaRa，RR420A）10μL、10 mmol·L-1正向引物0.8μL、10 mmol·L-1反向引物0.8μL、cDNA模板1μL和ddH2O 7.4μL，共计20μL。PCR扩增条件的设置为95℃30 s；95℃5 s，60℃20 s，40个循环后增加熔解曲线。每个样品进行3次重复，采用2-ΔΔCt法[27]进行基因表达量的相对定量分析。