《表1 本研究所用引物:油茶ETR基因鉴定及其在不同授粉处理下的表达分析》

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《油茶ETR基因鉴定及其在不同授粉处理下的表达分析》


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引物序列中小写字母代表载体序列,大写字母代表目的基因序列,下划线指示酶切位点。

根据油茶雌蕊全长转录组数据库中ETR1、ETR2.1和ETR2.2基因的全长编码序列(coding sequence,CDS)设计扩增引物:ETR1-F/ETR1-R、ETR2.1-F/ETR2.1-R、ETR2.2-F/ETR2.2-R(表1)。PCR反应体系(25μL):12.5μL Prime STAR HS、10μmol·L-1上下游引物各0.5μL、0.5μL模板,用双蒸水(ddH2O)补齐至25μL。反应程序:98°C预变性3min;98°C变性10 s,55°C退火5 s,72°C延伸2 min,35个循环;最后72°C延伸10 min;4°C保温。