《表1 本研究所用引物:基于表达谱分析陆地棉DUF642基因家族抗逆功能》

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《基于表达谱分析陆地棉DUF642基因家族抗逆功能》


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按照EASYspin Plant RNA kit试剂盒操作说明提取棉花根组织总RNA。经1.5%(质量分数)的琼脂糖凝胶电泳和Nano Drop 2000分光光度计检测RNA样品的质量和浓度后,使用ReverTra AceRqPCR RT Master Mix with g DNA Remover(TOBOYO)反转录试剂盒合成c DNA。采用THUNDERBIRDRSYBRRqPCR Mix(TOBO-YO)定量试剂盒进行RT-qPCR。反应于7500Real Time PCR System(Applied Biosystems)中进行,程序设置:95℃预变性3 min;95℃变性10 s,58℃退火20 s,72℃延伸34 s,40次循环。所用引物详见表1,其中Gh His3作为内参[32]。每个样品进行3次重复检测,采用2-ΔΔCT法计算基因的相对表达量[33]。使用GraphPad PrismR7软件对数据进行Tukey多重比较测试和绘图。