《表5 本研究所用引物：橡胶草促分裂活化蛋白激酶(MPK)基因家族进化和表达谱分析》

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《橡胶草促分裂活化蛋白激酶(MPK)基因家族进化和表达谱分析》

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橡胶草植株种植于人工光照培养箱，温度设定25℃，12 h光照，12 h黑暗培养。种植60 d的植株用于收取叶片、侧根、主根，种植120 d的植株收取花梗、花瓣和胶乳等材料。发芽后4周的橡胶草材料用200 mmol/L NaCl，4℃和37℃分别处理3 h和24 h后，收取叶片材料用于分析TkMPK胁迫响应。实时荧光定量PCR根据之前描述的步骤完成（Zhu et al.，2018）。简而言之，植物材料收取后液氮速冻并保存于-80℃冰箱。使用时称取100 mg材料液氮中充分研磨成粉，使用植物RNA快速提取试剂盒（天根，北京）提取总RNA。取1μg总RNA进行反转录制备c D-NA，反转录使用PrimeScriptTMⅡ1st Strand cDNA Synthesis Kit（TaKaRa，大连）。TkMPK和TkActin特异的引物（表5）。实时荧光定量PCR反应使用Light-Cycler 96（Roche，上海）完成。