《表1 本研究所用引物：不同品系肉鸡Gimap5基因的表达与功能》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《不同品系肉鸡Gimap5基因的表达与功能》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

本研究所用引物利用Primer Premier 5.0软件设计，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。根据红原鸡（Gallus gallus）Gimap5基因预测序列（GenBank登录号：XM＿015281120.2）设计PCR引物P1和P2，引物序列信息见表1。采用TRIzol试剂提取脾脏总RNA，利用逆转录试剂盒（FSQ301）合成cDNA（方法参照试剂说明书）。PCR反应体系（25μL）如下：2.5μL 10×Taq DNA聚合酶缓冲液，2.0μL dNTPs（2.5 mmol/L），0.8μL上、下游引物（10μmol/L），0.1μL Taq酶，0.5μL cDNA（20 ng/?L）和灭菌去离子水18.3μL。PCR反应条件为：94℃4 min；94℃30 s，56℃30 s，72℃45 s，30个循环；72℃10 min，4℃终止反应。将PCR产物纯化后克隆到p MD18-T载体上，鉴定为阳性的3个重组子交由华大基因科技服务（上海）有限公司测序。利用SOPMA、SWISS-MODEL和DNAMAN等软件对Giamp5基因的核苷酸序列和氨基酸序列进行生物信息学分析。