《表1 本研究所用引物:西瓜XBCl3家族的鉴定与抗病功能分析》

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《西瓜XBCl3家族的鉴定与抗病功能分析》


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采用RNA Isolater Reagent试剂盒(Vazyme Biotech,南京)提取植物总RNA。用HiScript Q RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)试剂盒(Vazyme Biotech,南京)处理除去基因组DNA污染,并反转录合成c DNA,用于基因扩增和表达分析。q PCR采用Ace Q qPCR SYBR Green Master Mix试剂盒(Vazyme Biotech,南京)在CFX96 Real-time System(Bio-Rad,Hercules,CA,USA)上进行,20μL反应体系含各0.5μL正向和反向引物(表1,10μmol·L-1)、0.5μL c DNA、10μL AceQ SYBR Green Master Mix、8.5μL ddH2O。反应条件为95°C 5 min,95°C 10 s、60°C 30 s、72°C 30 s,共38个循环。qPCR结果采用2-ΔΔCT方法计算(Livak和Schmittgen 2001)。以西瓜ClGAPDH或拟南芥AtActin基因为内参,以ClGAPDH或AtActin表达量的倍数来表示目的基因的相对表达水平。