《表1 本研究中所用引物：番茄匍柄霉叶斑病拮抗细菌的筛选与鉴定》

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《番茄匍柄霉叶斑病拮抗细菌的筛选与鉴定》

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采用DNA提取试剂盒[天根生化科技（北京）有限公司]提取菌株ZF161的总DNA，利用细菌16S rDNA通用引物27F/1492R（Weisburg et al.，1990）和针对目标基因设计引物gyrB-F/R、atpD-F/R和rpoA-F/R（表1）对菌株ZF161进行PCR扩增。反应体系（50μL）:2×Rapid Taq Master Mix（南京诺唯赞生物科技有限公司）25μL、上游引物和下游引物各0.5μL（10μmol·L-1）、DNA模板0.2μL(60 ng·mL-1），ddH2O补足剩余体积。PCR扩增程序均为：95℃10 min；95℃30 s，58℃30s，72℃45 s，34个循环；72℃8 min。PCR产物直接测序（北京博迈德基因技术有限公司）。参与比较分析的序列均来源于GenBank，用MEGA 6.0、Sequence Matrix、Seaview4按顺序连接、比对不同菌株的16S rDNA、gyrB、atpD、rpoA基因，采用最大似然法构建系统发育树，分析其亲缘关系。