《表1 本研究中所用融合群鉴定的引物序列及其来源》

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《甘肃省白菜死棵病病原菌鉴定及其融合群检测技术》

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采用试剂盒法提取病原菌基因组DNA。采用ITS通用引物对[22]及立枯丝核菌翻译延伸因子引物对RSF/RSR[23]对各菌株进行PCR扩增（表1），反应结束后，取5μL PCR产物用1.0%的琼脂糖凝胶电泳进行检测。将含有目的条带的PCR产物交由北京博迈德基因技术有限公司分别用各基因相对应的PCR扩增引物进行双向测序，将得到双向序列拼接，并将拼接后得到的序列提交到GenBank（表2），然后用MEGA 7.0软件根据各菌株ITS和TEF-1α基因序列进行系统发育进化分析。采用最大似然法（maximum likelihood，ML）构建系统发育进化树。同时采用MATSUMOTO[24]根据立枯丝核菌不同融合群的核糖体DNA序列差异设计的两对特异性引物（表1）对分离菌株进行PCR特异性扩增，用于鉴定分离菌株。