《表1 本研究所用引物及其序列》

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《小黑杨PnCCH10基因的克隆、功能初步鉴定及遗传转化》

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根据Phytozome（https://phytozome.jgi.doe.gov/pz/portal.html）中公布的毛果杨PtCCH10（Potri.006G006100.4）的核苷酸序列设计克隆小黑杨PnC-CH10基因的RT-PCR引物（表1）。利用BioFlux公司的pBIOZOL植物总RNA提取试剂盒提取小黑杨总RNA，去除基因组DNA后，使用PrimeScriptTM RT reagent Kit（TaKaRa）进行反转录合成cDNA第一条链。以获得的cDNA为模板、利用KOD-Plus-Neo酶（TOYOBO）扩增小黑杨PnCCH10的编码区。PCR反应程序为:98°C 10 s，55°C 30 s，68°C 40 s，35个循环。利用凝胶回收试剂盒（TIANGEN）回收目的片段。目的片段与pEASY克隆载体连接后转化大肠杆菌感受态细胞Trans1-T1；挑取阳性克隆扩大培养，利用质粒小提试剂盒（OMEGA）提取质粒，PCR检测后送测序。