《表1 本研究所用引物及其序列Tab.1 Primers and their sequences in this study》

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《尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种的磷酸化应激诱导蛋白1(FoSTIP1)基因的克隆及表达分析》

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按植物总RNA提取试剂盒说明书提取处理后菌株的总RNA，然后反转录获得cDNA第一链，利用荧光定量PCR试剂盒[Talent qPCR PreMix（SYBR Green）]进行相对荧光定量PCR分析，所用引物为:5?-STyg、3'-STyg，5?-Actin、3?-Actin（表1）。PCR反应体系按照荧光定量PCR试剂盒说明书配制。PCR反应在BIO-RAD公司的Mini OpticonTM Rreal-Time PCR System上进行。PCR热循环条件如下:94℃变性30 s；退火温度设梯度温度48～50℃，并退火15 s；72℃延伸15 s；然后读取荧光值，重复40个循环；最后从45～90℃，每隔0.2℃读取溶解曲线荧光值，每读数一次，停留2 s。运行完毕后，从Opticon Monitor 3.1软件读取C（t）值，以β-actin基因作为内参对照，检测目的基因在野生型菌株入侵香蕉苗以及H2O2处理时的表达水平时，采用2-ΔC（t）法计算，检测目的基因在FoSKN7基因缺失突变体菌株中的表达水平时，采用2-ΔΔC（t）法计算目的基因的相对表达水平。