《表1 本研究所用引物的序列Tab.1 Primers used in this study》

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《拟南芥叶绿体分裂突变体x17-3和pd50的基因鉴定与分析》


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为了检测x17-3和pd50中CRL基因mRNA含量,用实时荧光定量PCR对其表达量进行检测。利用拟南芥HTA9基因(AT1G52740)作为内参,使用Ultra SYBR Mixture(康为世纪)试剂盒进行实时荧光定量PCR。PCR反应体系为:2×SYBR Green I Mix10μL、CRL-7(5μmol/L)1μL、CRL-5(5μmol/L)1μL、c DNA 1μL,加去离子水至20μL。反应条件为:95℃10 min;95℃15 s,60℃1 min,采集信号,40个循环;熔解曲线分析如下:95℃15 s,60℃1 min,95℃15 s,60℃15 s,72℃30 s。实时荧光定量PCR仪器为Prism 7500 FAST Real-time PCR System(Applied Biosystems)。所有实验均进行3次重复。Ct值采用相对定量2-Δ(ΔCt)法分析,对结果进行t-检验分析。PCR引物序列见表1。