《表1 本研究所用引物序列》

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《成团泛菌苯丙氨酸氨基变位酶的热稳定性改造》


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以质粒pET-28a-PAM为模板,采用定点突变(重叠延伸)方法突变野生Pa PAM基因。相关引物如表1所示。PCR得到的基因产物用Dpn I酶消化以降解质粒模板,然后转化至E.coli JM109感受态细胞中。重组质粒经基因测序验证正确后,转化至E.coli BL21(DE3)中构建PAM突变体表达菌株。