《表1 本研究所用的引物序列》
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《鼠伤寒沙门氏菌双组分系统arcB基因缺失株的构建及药物敏感性分析》
注:带下划线的碱基是同源臂或限制性酶切位点,小写字母是点突变位点。
根据Gen Bank登录的鼠伤寒沙门氏菌arc B基因序列(SL1344_RS17190),利用Primer 5.0软件设计特异性鉴定引物、arc B基因敲除引物、回复引物以及点突变引物。其中arc B-F/arc B-R为鉴定引物,用于鉴定arc B基因缺失株;arc B-H1P1/arc B-H2P2为敲除引物(H1、H2代表arc B基因上下游各45 bp的同源臂;P1、P2代表kan+基因通用引物)用于扩增含arc B基因同源臂的kan+基因片段;引物k2/kt用于检测插入的kan+基因;引物arc B-F/kt和k2/arc B-R用于检测kan+基因插入的位置。利用Primer 5.0软件筛选arc B基因中不含且切割效率高的限制性内切酶,设计回复株引物arc B-Eco R I-F/arc B-Bam H I-R。引物均由西安擎科泽西生物科技有限责任公司合成,引物序列见表1。
图表编号 | XD00228847500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.09.01 |
作者 | 武珊珊、敬文宪、陈启伟、李学瑞、刘永生 |
绘制单位 | 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室、中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 |
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