《表1 本研究所用的引物序列》

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《CRISPR/Cas9介导靶向敲除拟南芥REVOLUTA基因突变体的鉴定》


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注:小写字母代表保护碱基

拟南芥REV基因全长5 215 bp,含18个外显子和17个内含子。选择包含前3个外显子在内的1 000 bp左右长度,利用在线工具进行分析,对给出的潜在靶点列表进一步按照“脱靶可能性”进行排序,且GC含量大于50%,选定2个序列为靶点序列T1 (5'-TACTGTCACTGCTTCTCTCA-3')和T2 (5'-CGATCCAAGCTGTGAATCTG-3'),分别位于REV基因第1和第3个外显子上。根据靶点序列设计对应的靶点接头引物(表1),交由上海英骏生物技术有限公司合成,纯化方式为i PAGE。