《表1 本研究所用的引物:甜樱桃PaPME1与PaPME2在果实成熟软化中的功能分析》

《表1 本研究所用的引物:甜樱桃PaPME1与PaPME2在果实成熟软化中的功能分析》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《甜樱桃PaPME1与PaPME2在果实成熟软化中的功能分析》


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p TRV2-Pa PME1和p TRV2-Pa PME2载体的构建采用In-Fusion Cloning技术。分别设计带有16个重叠区域(与经Eco RⅠ和KpnⅠ线性化的p TRV2片段互为反向互补的接头)的Pa PME1和Pa PME2基因特异性引物对Pa PME1-F/R和Pa PME2-F/R(表1),以甜樱桃c DNA为模板扩增出Pa PME1和Pa PME2的片段,利用In-FusionTMHD Cloning kit(Clontech,Mount-ain View,CA,United States)分别将扩增得到的Pa PME1和Pa PME2基因片段连接到经Eco RⅠ和KpnⅠ双酶切线性化的p TRV2载体上,构建成p TRV2-Pa PME1和p TRV2-Pa PME2重组载体,并转入大肠杆菌DH5α感受态中,挑取阳性菌株,经PCR鉴定,双酶切鉴定和测序正确后,分别将p TRV2-Pa PME1和p TRV2-Pa PME2载体转入农杆菌菌种GV3101中备用。