《表2.本研究所用引物:大豆快生根瘤菌SMH12效应蛋白NopP在共生固氮过程中的功能》

《表2.本研究所用引物:大豆快生根瘤菌SMH12效应蛋白NopP在共生固氮过程中的功能》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《大豆快生根瘤菌SMH12效应蛋白NopP在共生固氮过程中的功能》


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利用Crelox系统双交换置换缺失的方法[20],构建nop P缺失突变体。以SMH12基因组DNA为模板,采用nop P-up-F/R和nop P-down-F/R引物对,分别扩增nop P同源交换上臂和下臂,将产物连接到载体p MD19-T (simple),测序正确后将其双酶切后分两步与消化的p CM351载体连接,得到质粒p CM351::nop P-up-down转化至E.coli S17-1中,经两亲本结合转移,稀释涂布于SM+Str+Gm平板上,经引物对nop P-MAP-F/R及Gm-F/R筛选转化子,进行PCR验证突变体。