《表1 所用引物及序列:杨树SHMT基因家族分析及PtrSHMT9突变体创制》

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《杨树SHMT基因家族分析及PtrSHMT9突变体创制》


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以稀释100倍的PCBC-DT1T2质粒为模板,DT1-Bs F、DT2-Bs R、DT1-F0和DT2-R0为引物,用高保真DNA聚合酶KOD-plus扩增Ptr SHMT9靶位点序列的g RNA片段,扩增产物经琼脂糖电泳,胶内的目标DNA片段被回收,经BsaⅠ酶切和T4DNA连接酶连接到p HSE401植物基因编辑载体[20]。转入DH5α大肠杆菌,经Kana抗性筛选阳性p HSE401-g RNA质粒的菌液,DNA测序确认重组质粒后转入GV3101农杆菌,用于毛果杨遗传转化实验。实验所用引物及序列参见表1。