《表1 实验所用引物:孤独谱系障碍相关基因dia1r斑马鱼突变体的构建及行为学表型探析》

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《孤独谱系障碍相关基因dia1r斑马鱼突变体的构建及行为学表型探析》


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从Ensembl网站(http:∥asia.ensembl.org/index.html)下载dia1r基因序列(ENSDARG00000061747),选取其进化最保守的区域蛋白激酶结构域所对应的序列设计gRNA(guide RNA),通过CCTop网站(https:∥crispr.cos.uni-heidelberg.de/)[21]、麻省理工学院张锋实验室网站(https:∥zlab.bio/guide-designresources)[22]和CHOPCHOP网站(http:∥chopchop.cbu.uib.no/)[23]分别设计评分,根据三者反馈的列表综合选取最优的gRNA序列,其靶标位点为GAGAGGAAAACAGGGTCCTGAGG(表1,已用下划线标出),其中AGG为PAM序列.