《表1 引物列表:转PcLIPH8基因水稻的构建及其相关表型分析》

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《转PcLIPH8基因水稻的构建及其相关表型分析》


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利用Invitrogen公司的TRIzol试剂分别提取野生型和转基因水稻株系幼苗的总RNA。琼脂糖凝胶电泳检测后,选取质量完好的RNA用于下一步的逆转录。取1μg总RNA,利用宝生(TaKaRa)公司反转录试剂盒反转录合成cDNA,-20℃冰箱保存,用于转基因株系的鉴定。设计PcLIPH8的特异性引物所用引物均见表1,对转基因水稻株系中的PcLIPH8表达量分析,以野生型水稻作为阴性对照。PCR扩增程序为:94℃预变性5min,94℃变性30s,56℃复性30s,72℃延伸30s,共35个循环。以水稻OsACTIN1基因作为PCR的内参,3次生物学重复。2-ΔCt法分析qRT-PCR试验数据。半定量RT-PCR产物在1%琼脂糖凝胶上电泳并用凝胶成像系统分析。