《表1 引物名称及序列:水稻多胚基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建》

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《水稻多胚基因CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建》


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根据在NCBI中公布的水稻基因组序列,查找多胚基因Os PE的序列。利用在线软件CRISPR-P分析多胚基因的靶点特异性,在ORF功能结构区域筛选挑选合适的靶点,靶点的GC含量不低于40%,选择合适的Cas9靶点序列为T1:TGCTCTGTCTGAGTAAAGCA。利用Primer-5软件设计编辑引物,引物由擎科(武汉)生物科技有限公司合成,纯化级别PAGE。依据靶位点序列及sg RNA构建方法选择引物(见表1)。