《表1 研究所用的引物：甘蓝型油菜BnaSDG8基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及功能探究》

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《甘蓝型油菜BnaSDG8基因CRISPR/Cas9敲除载体的构建及功能探究》

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参照LIU等[14]的方法，利用油菜数据库（www.genoscope.cns.fr/spip/）提供的信息进行比对，设计CRISPR/Cas9系统可识别的靶位点核苷酸序列。在Bna SDG8–A和Bna SDG8–C基因的编码区上寻找包含Cas9识别位点PAM序列的片段，以PAM序列之前20 nt的序列作为敲除靶位点序列（图1）。在敲除靶位点序列加上限制性内切酶Bpi I酶切位点，获得正向引物Oligo1和反向引物Oligo 2（表1），送至擎科生物技术（湖南）股份有限公司合成引物。