《表1 实验所用引物：番茄中CRISPR/Cas9多靶点敲除载体构建》

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《番茄中CRISPR/Cas9多靶点敲除载体构建》

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在NCBI网站找到LeETR3和LCY-B基因序列，通过人工比对或CRISPRdirect找到合适的靶位点序列，设计靶点接头引物，通过Primer5设计阳性鉴定引物，见表1所列。将接头引物溶解成100μmol/L母液，各取1μL加入到98μL0.5xTE混合稀释到1μmol/L。约90℃、30s，移至室温冷却完成退火。