《表1 实验中所用引物：CRISPR/Cas9技术在创制番茄雄性不育株系中的应用研究》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《CRISPR/Cas9技术在创制番茄雄性不育株系中的应用研究》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

下划线指示与BC-CRISPR载体经BsaⅠ酶切产生的粘性末端互补的序列

将SlAP3-Oligo1-F/R和SlAP3-Oligo2-F/R分别通过引物退火的方式结合成带粘性末端的双链DNA片段，通过BsaⅠ内切酶连接到BC-CRISPR载体上，连接的体系为:插入片段1μL，BsaⅠ酶切后载体0.5μL，连接酶缓冲液1μL，T4连接酶0.1μL，dd H2O 7.4μL。室温下连接30 min。转化大肠杆菌（DH5α）后，挑取阳性克隆送至北京华大基因公司测序验证。将构建成功的2个载体分别命名为BC-CRISPR-SlAP3Targ1及BC-CRISPR-SlAP3Targ2。质粒经电击转化农杆菌GV3101，选取阳性克隆摇菌液，加入12%甘油于-80℃冰箱中保存备用。所用引物见表1。