《表1 引物的序列信息:以雄性不育胞质杂种‘华柚2号’为母本创制柚有性群体》

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《以雄性不育胞质杂种‘华柚2号’为母本创制柚有性群体》


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从已公开发表的SSR引物[12-13]中筛选到3对亲本间多态性好的引物对2个组合的后代进行遗传鉴定(表1)。反应体系为10μL,包括1μL DNA模板,5μL Master mix (Dream Tag Green PCR,兴华基因),0.15μL正向引物,0.15μL反向引物,3.7μL灭菌双蒸水。PCR扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s;55~58℃退火30 s;72℃延伸30 s;34个循环;72℃延伸10 min;最后4℃保存。扩增产物95℃加热变性5 min,在恒定功率80 W条件下,6%聚丙烯酰胺凝胶电泳1 h后银染显色。