《表1 靶位点鉴定引物:利用CRISPR/Cas9技术敲除TLR3基因及其影响NDV复制的研究》

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《利用CRISPR/Cas9技术敲除TLR3基因及其影响NDV复制的研究》


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转染36~48 h后,流式细胞仪分选表达绿色荧光蛋白(EGFP)的MDCK细胞,分选后1周再提取基因组经鉴定引物(TLR3-S) PCR,初步筛选TLR3基因敲除的MDCK细胞;然后经测序引物(TLR3-L) PCR扩增,进行测序分析;提取细胞总蛋白,经Western-blot鉴定后筛选敲除TLR3基因的MDCK细胞株。测序引物和鉴定引物见表1。