《表1 嵌合体及突变体所用引物》

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《副粘病毒HN蛋白颈部与F相互作用区功能的研究》

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注:置换片段及突变位点均用下划线标出Note:Fragment replacement and mutated sites are underlined in the primer sequence

利用片段置换、同源重组相结合的方法构建嵌合体，突变体的获得通过定点突变及同源重组相结合。利用软件Primer Premier 5.0设计同源互补的PCR引物（表1），以NDV S51A为例，说明突变体引物设计方法，将NDV HN颈部FIR第51位编码丝氨酸（Serine，S）的碱基AGC更改为编码丙氨酸（A）的GCT，设计上游引物N51F、下游引物N51R。对NDV，使用KpnI及SacI分别单酶切NDV HN质粒；对hPIV3，使用EcoR I及XbaI分别单酶切hPIV3HN质粒，电泳后回收得到4条线性模板，分别命名为模板1、模板2、模板3、模板4。通过转化将扩增产物在DH5α中进行同源重组。