《表1 试验中所用的引物:二倍体马铃薯StBRC1a功能缺失突变体的获得及其功能分析》
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《二倍体马铃薯StBRC1a功能缺失突变体的获得及其功能分析》
利用CTAB法提取再生植株的基因组DNA,使用pKSE401载体上的特异性引物35s-seq-F与Cas9-test-R(表1)进行PCR扩增,检测再生植株是否有T-DNA插入。根据靶点设计特异性引物BRC1a-genome-F与BRC1a-genome-R(表1),并对阳性转基因植株进行PCR扩增。将扩增的PCR产物进行一代Sanger法测序,将测序结果与野生型的序列使用软件Geneious进行比对,筛选出纯合的突变体。将筛选出的突变体与野生型植株分别扩繁成2株并进行继代培养,在30和60 d时分别对其中1株进行拍照和统计分枝数(Guo et al.,2015):首先统计主枝上的节点数,再对各个节点上的初级分枝、次级分枝、3级分枝以及腋芽数进行统计。
图表编号 | XD00126822300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.01.25 |
作者 | 冯爽爽、罗嘉翼、朱曦鉴、蒋继滨、黄三文、张金喆 |
绘制单位 | 南京农业大学生命科学学院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、南京农业大学生命科学学院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、云南师范大学生命科学学院、中国农业科学院蔬菜花卉研究所、云南师范大学生命科学学院、南京农业大学生命科学学院、中国农业科学院深圳农业基因组研究所、中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
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