《表2 ZBED6基因启动子区调控元件缺失突变所用引物》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《调控民猪ZBED6基因转录元件的筛选与分析》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

注:下划线表示引入的酶切位点KpnⅠ

根据在线软件的预测结果，设计并合成用于ZBED6基因启动子区各转录因子结合位点缺失的引物，引物序列见表2。利用重叠延伸PCR法获得定点突变片段，重叠延伸PCR主要通过3个PCR反应完成:（1）以Adf-1调控元件的突变为例，首先以pMD18-ZBED6质粒为模板，用正向侧引物A和突变引物Del-Adf-1-R进行PCR1扩增，扩增产物含有突变位点及其上游片段；（2）以pMD18-ZBED6质粒为模板，用反向侧引物RS和突变引物Del-Adf-1-F进行PCR2扩增，扩增产物含有突变位点及其下游片段；（3）分别胶回收PCR1和PCR2扩增产物，等比例混合后，以此为模板，使用正反向引物A和RS进行PCR3扩增，扩增产物即为引入目的突变的靶序列，然后按照上述方法连入pGL3-basic载体。其他调控元件缺失载体的构建均按照此方法进行。