《表1 扩增ZBED6基因截短型启动子所用引物》

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《调控民猪ZBED6基因转录元件的筛选与分析》

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注:下划线表示引入的酶切位点KpnⅠ和HindⅢ

以引物A和R1所扩增的片段为基础，设计7对系列缺失引物，引物信息见表1，其中R1为通用下游引物，以重组质粒pMD18-ZBED6为模板扩增系列截短型片段，反应体系及反应条件同上，退火温度均为55℃。反应结束后各系列片段按照1.2.2方法分别连入pGL3-Basic载体内。第1轮构建了5个截短型质粒，分别命名为pB（-1897/-21）-ZBED6、pC（-1863/-21）-ZBED6、pD（-1808/-21）-ZBED6、pG（-1777/-21）-ZBED6和pH（-1462/-21）-ZBED6。第2轮构建了2个截短型质粒，分别命名为pE（-1800/-21）-ZBED6和pF（-1787/-21）-ZBED6。