《表2 扩增大鼠IRF-8基因启动子(全长和截短)的引物序列》
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《NF-κB p65调控IRF-8基因启动子活性及其启动子结合元件的初步鉴定》
通过Nucleotide数据库查找大鼠p65基因mRNA序列(NM_199267.2)和大鼠IRF-8基因DNA序列(NC_005118.4),利用Primer 5.0软件设计表达连接有HA标签的大鼠p65基因CDS区序列的引物,引物上下游分别加入酶切位点和保护性碱基序列。上游引物:5'-CCGCTCGAGGCCATGTACCCA-TA-CGATGTTCCAGATTACGCTGACGATCTGTT-3';下游引物:5'-TCCCCGCGGGCCCCTCAAATGCTGGT-3'。下划线分别表示XhoⅠ、SacⅡ酶切位点,CCG、TCC为保护性碱基。用Primer 5.0软件设计针对IRF-8基因启动子全长(-1 892~+174)的引物,然后应用JASPAR软件预测IRF-8启动子区域p65的可能结合元件(表1),根据预测的结合元件设计启动子各截短片段,并用Primer 5.0软件设计相应的引物。启动子全长与截短的扩增引物序列见表2(下划线分别表示SacⅠ、HindⅢ酶切元件,C、CCC为保护性碱基)。
图表编号 | XD00167380500 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.05.15 |
作者 | 王文博、钱宝梅、罗灿、彭明玉、张婧、赵聃、王迎伟、邱文、季明德 |
绘制单位 | 南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、南京医科大学免疫学系、江苏省中医院检验科 |
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