《表1 8个基因的启动子PCR扩增引物》

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《应用枇杷二代测序数据进行染色体步移研究》

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根据步移结果设计引物（表1），使用PCR扩增获得‘火炬’枇杷的启动子序列进行验证。PCR反应体系为20μL(10μL LA Taq HS premix，1μL上游引物，1μL下游引物，DNA样品1μL，双蒸水7μL）。PCR程序为：94℃5 min；94℃30 s，55℃30 s，72℃2 min30 s，35个循环。通过电泳割胶回收产物。使用Promega pGEM-T Easy对PCR产物和PUC19载体进行连接，转化到DH5α大肠杆菌，涂板挑选单克隆菌株送生工生物测序。使用Clustalx对预测和测序的序列进行比对[12]。